Mundarija:

Jel elektroforezini qanday yuklaysiz?
Jel elektroforezini qanday yuklaysiz?

Video: Jel elektroforezini qanday yuklaysiz?

Video: Jel elektroforezini qanday yuklaysiz?
Video: Gel elektroforez | Biotexnologiya | Biologiya 2024, Noyabr
Anonim

Namunalarni yuklash va agaroza jelini ishga tushirish:

  1. Qo'shish yuklash DNK namunalaringizning har biriga bufer.
  2. Qattiqlashgandan keyin agarozni joylashtiring gel ichiga gel quti ( elektroforez birlik).
  3. To'ldirish gel gacha 1xTAE (yoki TBE) bilan quti gel qoplangan.
  4. Ehtiyotkorlik bilan yuk birinchi qatorga molekulyar og'irlikdagi narvon gel .

Shu munosabat bilan gel elektroforezi uchun qancha DNK yuklash kerak?

Miqdori Yuklash uchun DNK har bir quduq o'zgaruvchan. Eng kam miqdori DNK etid bromidi bilan aniqlanishi mumkin bo'lgan 10 ng. DNK har bir quduq uchun 100 ng gacha bo'lgan miqdorlar etidiy bromidda o'tkir, toza tasma bo'yalganiga olib keladi. gel.

Bundan tashqari, nima uchun jel elektroforezida suv o'rniga bufer ishlatiladi? The bufer DNK eritmasining pH qiymatini neytral darajaga yaqin ushlab turish uchun kerak, chunki u elektroliz orqali kislotali bo'lishi mumkin. Elektrodlar keltirib chiqaradigan elektr oqimlari sabab bo'lishi mumkin suv molekulalar H+ ionlarini ajratish va chiqarish uchun.

Odamlar ham so'rashadi, nima uchun jel elektroforezida marker ishlatiladi?

Kichikroq bo'laklar ilon orqali o'tayotganda kattaroq qismlarga qaraganda tezroq va shuning uchun uzoqroq harakatlanadi gel . Nima uchun marker ishlatiladi bo'laklarni o'tkazayotganda gel ? A marker ma'lum o'lchamdagi DNK parchalarini o'z ichiga oladi. Belgilar har birida boshqariladi gel boshqa noma'lum bo'laklar bilan solishtirish uchun gel chiziqlar.

Agaroz jelida qancha DNK ko'rish mumkin?

Ko'pchilik agaroz jellari 0,7% dan 2% gacha amalga oshiriladi. 0,7% gel bo'ladi kattaning yaxshi ajratilishini (rezolyutsiyasini) ko'rsatish DNK fragmentlar (5–10 kb) va 2% gel bo'ladi kichik bo'laklar uchun yaxshi ruxsatni ko'rsatish (0,2-1 kb).

Tavsiya: