Mundarija:

Absorbsiyadan DNK kontsentratsiyasini qanday topasiz?
Absorbsiyadan DNK kontsentratsiyasini qanday topasiz?

Video: Absorbsiyadan DNK kontsentratsiyasini qanday topasiz?

Video: Absorbsiyadan DNK kontsentratsiyasini qanday topasiz?
Video: Nega kimyoni yillar davomida o'qib test yechishga qiynalamiz? 2024, Dekabr
Anonim

DNK kontsentratsiyasi ni o‘lchash yo‘li bilan baholanadi absorbsiya 260nm da, A ni sozlash260 loyqalikni o'lchash (o'lchangan absorbsiya 320nm da), suyultirish koeffitsientiga ko'paytirish va A260 1,0 = 50µg/ml sof dsDNK.

Xuddi shunday, odamlar DNK kontsentratsiyasini qanday topish mumkin?

Dastlabki namunadagi DNK kontsentratsiyasini aniqlash uchun quyidagi hisob-kitoblarni bajaring:

  1. dsDNK konsentratsiyasi = 50 mkg/ml × OD260 × suyultirish omili.
  2. dsDNK konsentratsiyasi = 50 mkg/ml × 0,65 × 50.
  3. dsDNK konsentratsiyasi = 1,63 mg/ml.

Bundan tashqari, yaxshi DNK konsentratsiyasi nima? A yaxshi sifat DNK namunada A bo'lishi kerak260/A280 nisbati 1,7-2,0 va A260/A230 nisbati 1,5 dan yuqori, lekin turli usullarning ushbu ifloslantiruvchi moddalarga nisbatan sezgirligi har xil bo'lganligi sababli, bu qiymatlar faqat namunangizning tozaligi uchun qo'llanma sifatida olinishi kerak.

Shu tarzda, DNK 280 nm da so'riladimi?

Absorbsiya nisbati 260 da nm va boshqalar 280 nm baholash uchun keng foydalaniladi DNK oqsil eritmalarining ifloslanishi, chunki oqsillar (xususan, aromatik aminokislotalar) singdirish yorug'lik da 280 nm.

DNK konsentratsiyasi uchun NanoDrop-dan qanday foydalanasiz?

Asosan nanodrop tanlash imkoniyatini beradi DNK , RNK, oqsillar. Siz tanlashingiz kerak DNK , keyin 2 L suv qo'ying (mili Q afzal) "Bo'sh" ni tanlang, keyin o'lchov 0 ekanligini tasdiqlash uchun yana 2 L suv qo'ying. Keyin namunangizdan 2 L L qo'ying. Siz o'lchovni olasiz.

Tavsiya: