O'simlik to'qimalaridan DNK qanday olinadi?

2024 Muallif: Miles Stephen | [email protected]. Oxirgi o'zgartirilgan: 2023-12-15 23:41

Hujayra tarkibiy qismlarini chiqarish uchun hujayra devorlari sinishi (yoki hazm bo'lishi) kerak. Bu, odatda, silliqlash orqali amalga oshiriladi to'qima quruq muzda yoki suyuq azotda ohak va pestel yoki oziq-ovqat maydalagich bilan. Hujayra membranalari buzilgan bo'lishi kerak, shuning uchun DNK ichiga chiqariladi qazib olish bufer.

Xuddi shunday savol tug'ilishi mumkin: DNKni olish usullari qanday?

Eng keng tarqalganlardan ba'zilari DNKni ajratib olish usullari organik moddalarni o'z ichiga oladi qazib olish , Chelex qazib olish , va qattiq faza qazib olish . Bular usullari doimiy ravishda izolyatsiya qilingan hosil DNK , lekin ular sifati va miqdori jihatidan farq qiladi DNK berdi.

Shuningdek, bilingki, CTAB DNK ekstraktsiyasi qanday ishlaydi? CTAB davomida foydalanish uchun eng yaxshi yuvish vositasi sifatida bir muddat oldin yaratilgan qazib olish / izolyatsiya yuqori darajada polimerlangan DNK o'simlik materialidan. Ushbu yuvish vositasi bir vaqtning o'zida o'simlik hujayra devorini va ichki organellalarning lipid membranalarini eriydi va oqsillarni (fermentlarni) denatüratsiya qiladi.

Yuqoridagilardan tashqari, qanday qilib DNK ekstraktsiyasi buferini yaratasiz?

DNK ekstraktsiyasi buferi : Tarkibida 0,1 M EDTA @ pH 8, 1% SDS va 200 mkg/ml proteinaz K. Qilish umumiy hajmi 50 ml bo'lgan 10 ml EDTA pH8, 5 ml 10% SDS va 35 ml MilliQ suvni birlashtirib, 50 ml 0,1 M EDTA-1% SDS zaxirasi. Vorteks orqali yaxshilab aralashtiriladi.

DNK ekstraktsiyasining 4 asosiy bosqichi qanday?

The DNK ekstraktsiya jarayoni ozod qiladi DNK hujayradan va keyin uni hujayra suyuqligidan va oqsillardan ajratadi, shuning uchun siz toza holda qolasiz DNK . Uch asosiy qadamlar ning DNK ekstraktsiyasi 1) lizis, 2) cho'kma va 3) tozalash.

DNKni ajratib olish asoslari

1. 1-qadam: Lizis.
2. 2-qadam: yog'ingarchilik.
3. 3-qadam: tozalash.