Mundarija:

PCR uchun qanday reagentlar kerak va ularning har biri qanday vazifani bajaradi?
PCR uchun qanday reagentlar kerak va ularning har biri qanday vazifani bajaradi?

Video: PCR uchun qanday reagentlar kerak va ularning har biri qanday vazifani bajaradi?

Video: PCR uchun qanday reagentlar kerak va ularning har biri qanday vazifani bajaradi?
Video: Molekulyar genetikada qo'laniladigan tadqiqot usullari 2024, Noyabr
Anonim

Beshta asosiy mavjud reaktivlar , yoki ingredientlar, ishlatiladigan PCR : shablon DNK, PCR primerlar, nukleotidlar, PCR bufer va Taq polimeraza. Primerlar odatda juft bo'lib ishlatiladi va ikki primer orasidagi DNK davomida kuchaytiriladi PCR reaktsiya.

Bundan tashqari, PCR reaktsiyasi uchun nima kerak?

A ning asosiy tarkibiy qismlari PCR reaktsiyasi DNK shablonini, primerlarni, nukleotidlarni, DNK polimerazasini va buferni o'z ichiga oladi. DNK shabloni odatda sizning DNK namunangiz bo'lib, unda kuchaytirilishi kerak bo'lgan DNK mintaqasi mavjud. Muvaffaqiyatli bo'lish uchun astar dizayni juda muhimdir PCR reaktsiyasi.

Bundan tashqari, PCR buferining vazifasi nima? Bufer . PCR a da amalga oshiriladi bufer Bu DNK polimeraza faolligi uchun mos kimyoviy muhitni ta'minlaydi. The bufer pH odatda 8,0 dan 9,5 gacha bo'ladi va ko'pincha Tris-HCl tomonidan barqarorlashtiriladi. Uchun Taq DNK polimeraza, umumiy komponent bufer kaliy ionidir (K+) primer tavlanishiga yordam beruvchi KCl dan.

Buni hisobga olsak, PCR usuli nima?

PCR ( polimeraza zanjiri reaktsiyasi ) a usuli DNKning (yoki RNKning) qisqa ketma-ketligini hatto juda oz miqdorda DNK yoki RNK o'z ichiga olgan namunalarda ham tahlil qilish. PCR DNK yoki RNKning tanlangan bo'limlarini ko'paytirish (kuchaytirish) uchun ishlatiladi. PCR DNKning ko'p sonli nusxalarini yaratish juda samarali.

PCRning 4 bosqichi qanday?

DNK ketma-ketligida polimeraza zanjiri reaktsiyasida ishtirok etadigan bosqichlar

  • 1-qadam: Issiqlik bilan denatürasyon: Issiqlik odatda 90 darajadan yuqori bo'ladi, bunda ikki zanjirli DNK ikkita bitta ipga ajratiladi.
  • 2-qadam: Astarni maqsadli ketma-ketlikka tavlash:
  • 3-qadam: Kengaytma:
  • 4-qadam: Birinchi PGR tsiklining oxiri:

Tavsiya: