Odatda nima DNK klonlash vektori bo'lib xizmat qiladi?
Odatda nima DNK klonlash vektori bo'lib xizmat qiladi?

Video: Odatda nima DNK klonlash vektori bo'lib xizmat qiladi?

Video: Odatda nima DNK klonlash vektori bo'lib xizmat qiladi?
Video: DNK klonlanishi va rekombinant DNK | Biotexnologiya | Biologiya 2024, Noyabr
Anonim

Ko'p turlari mavjud vektorlarni klonlash , lekin eng ko'p odatda ishlatiladiganlar genetik jihatdan yaratilgan plazmidlardir. Klonlash odatda birinchi bo'lib Escherichia coli yordamida amalga oshiriladi va vektorlarni klonlash E. coli ga plazmidlar, bakteriofaglar (masalan, fag l), kosmidlar va bakterial sun'iy xromosomalar (BAC) kiradi.

Shuningdek, DNK klonlashda vektor nima?

Molekulyar klonlash , a vektor a DNK begona genetik materialni sun'iy ravishda boshqa hujayraga o'tkazish uchun vosita sifatida ishlatiladigan molekula, u erda uni ko'paytirish va / yoki ifodalash mumkin (masalan, plazmid, kosmid, Lambda faglari). A vektor xorijiy o'z ichiga olgan DNK rekombinant deb ataladi DNK.

Shuningdek, bilingki, vektorni qanday klonlash mumkin? Eksperimental protsedura

  1. PCRni ishga tushiring va PCR mahsulotini tozalang: Insert DNKni kuchaytirish uchun PCRni ishga tushiring.
  2. DNKingizni hazm qiling:
  3. Insert va vektorni jel bilan tozalash orqali ajratib oling:
  4. Qo'shimchangizni vektoringizga bog'lang:
  5. Transformatsiya:
  6. Tayyor plazmidni ajratib oling:
  7. Plazmidingizni ketma-ketlik bilan tasdiqlang:

Shu munosabat bilan pBR322 klonlash vektori sifatida qanday ishlaydi?

pBR322 Plazmid pBR322 maqsadida ishlatiladigan birinchi plazmidlardan biri edi klonlash . U tetratsiklin va ampitsillinga qarshilik genlarini o'z ichiga oladi. DNKni maxsus cheklash joylariga kiritish mumkin tetratsiklin (insertatsiya inaktivatsiyasi deb nomlanuvchi ta'sir) yoki ampitsillin qarshiligi genini inaktivatsiya qilish.

Qaysi usul DNKning ma'lum bir qismining ko'p nusxalarini juda tez yaratishga imkon beradi?

Polimeraza zanjiri reaktsiyasi

Tavsiya: